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凝膠遷移或電泳遷移率實驗(EMSA-electrophoretic mobility shift assay)是一種研究DNA結合蛋白和其相關的DNA結合序列相互作用的技術,可用於定性和定量分析。這一技術開始用於研究DNA結合蛋白,目前已用於研究RNA結合蛋白和特定的RNA序列的相互作用。
技術原理
如圖所示,DNA-複合物比非結合的探針移動得慢;當檢測DNA結合蛋白,可用純化蛋白、部分純化蛋白或核細胞抽提液;競爭實驗中采用含蛋白結合序列的DNA片段和寡核苷酸片段(特異)和其它非特異性結合片段,來確定DNA結合蛋白的特異性;在競爭的特異和非特異片段的存在下,依據複合物的特點和強度來確定特異結合。
技術流程
樣品要求
1、目的蛋白抗體
2、待檢測的細胞樣品
3、目的基因、目的蛋白信息
結果展示
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