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Western Blot

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Western Blot

  • 所屬分類:常規分子生物學技術

  • 點擊次數:
  • 發布日期:2018/11/20
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詳細介紹

Western blot,也稱Western、Western blotting、Western印跡,是使用抗體檢測蛋白的應用很廣泛且的技術方法。

 

技術原理

與 Southern或Northern雜交方法類似,但Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝膠電泳,被檢測物是蛋白質,“探針”是抗體,“顯色”用標記的二抗。經過PAGE分離的蛋白質樣品,轉移到固相載體(例如硝 酸纖維素薄膜)上,固相載體以非共價鍵形式吸附蛋白質,且能保持電泳分離的多肽類型及其生物學活性不變。以固相載體上的蛋白質或多肽作為抗原,與對應的抗體起免疫反應,再與酶或同位素標記的第二抗體起反應,經過底物顯色或放射自顯影以檢測電泳分離的特異性目的基因表達的蛋白成分。

 

技術流程

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1、 組織或細胞采集

2、 樣品製備

3、 SDS-PAGE

4、 轉膜

5、 一抗孵育

6、 二抗孵育

7、 顯影 

 

服務特點

1. 分辨率高,采用SDS-PAGE變性電泳。底片是DAB發光液顯色(Ecl);

2. 靈敏度高,可檢測到pg級。xrk向日葵app可供選擇的內參包括:GAPDH,β-actin;

3. 準確性高,通過與內參蛋白比較靶蛋白的相對含量。

 

樣品要求

1. 足量新鮮的組織或細胞樣品;標本重量最好不低於5mg;

2. 標本取材後要-80℃保存,幹冰運輸

3. 相應的一抗,如委托xrk向日葵app購買需要提供一抗的品牌及其貨號

4. 目的蛋白相關的文獻資料。

客戶須知:

對預做實驗提供的樣品要求:應是新鮮的組織細胞樣品,需低溫保存提供到我公司

實驗所用試劑;除第一抗體外,所有試劑免費,用戶無須另行購買

因用戶所提供的樣品或試劑所導致的實驗問題,由用戶負責。

結果展示:

基因表達調控 


本文網址:http://www.celebsonice.com/product/566.html

關鍵詞:基因表達定量,基因表達調控,表觀組學技術服務

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