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呂梁絕對定量轉錄組測序

呂梁絕對定量轉錄組測序

  • 所屬分類:呂梁高通量轉錄調控技術

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  • 發布日期:2018/11/20
  • 在線詢價
詳細介紹

常規轉錄組測序由於文庫存在PCR擴增偏好性,所有序列並不會被同比例放大,因而造成測序定量結果與樣本中轉錄本的原始豐度不一致,導致差異基因篩選不準確。這也是造成qPCR驗證測序結果不一致的主要原因。武漢xrk向日葵app生物推出的絕對定量轉錄組測序消除PCR擴增偏好對定量的幹擾,真實反映樣本中轉錄本的表達豐度。


技術原理

在文庫擴增之前為每一條RNA片段加上唯一的身份標簽(Unique Identifier,UID),同一片段擴增產物均帶有相同的標簽,而天然重複片段則帶有不同的標簽。測序完成後利用UID過濾數據,將相同標記的擴增產物進行合並,就能準確去除PCR擴增重複、同時保留樣本的天然重複,在此過程中,PCR擴增和測序錯誤同樣可以被糾正。


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技術流程


基因表達調控

基因表達定量


樣品要求

1、 細胞樣本:3 X 10^6~1 X 10^7個

2、 動物組織:1-2g

3、 植物組織:3-4g(100mg左右分裝)

4、 RNA:請提供≥15μg,OD260/280=1.8~2.2,OD260/230≥2.0,濃度≥400ng/μl,28S:18S≥1.0,23S:16S≥1.5;




本文網址:http://www.celebsonice.com/product/583.html

關鍵詞:表觀組學技術服務,基因表達調控,基因表達定量

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